Beyin araştırmalarına temel oluşturacak madde düzeyleri için HPLC yöntemi

Abstract

Bu çalışmada, beyindeki katekolamin düzeylerinin tayini için floresans dedektörlü yüksek performanslı sıvı kromatografisi (HPLC) tekniğinin kullanıldığı bir yöntem tanıtılmaktadır. 0.030 M NaH2PO4.2H2O, 2.4x10-³ M sodyum heptansulfonat, 6.0x10-5 M Na2EDTA ve % 7.2 metanol (pH 4.11)den oluşan hareketli faz ortamında 3 mm x 150 mm, 3µ tanecik çaplı c18 kolonlarda noradrenalin, adrenalin, 3,4-dihidroksibenzilamin (iç standart) ve dopamin sırasıyla 4.3 dk, 5.0 dk, 6.7 dk ve 10.00 dk alıkonma zamanlarında görülen pikleri ile ayrılmış ve tayin edilmiştir. Yöntemin tekrar edilebilirliği, seçiciliği, doğrusallığı ve geri kazanım oranı incelenmiştir. Asidik alumina kullanılarak yapılan ekstraksiyon işlemi ile noradrenalin, adrenalin ve dopamin için sırasıyla % 73.91, %73.76 ve % 75.46 geri kazaım sağlanmıştır. Yöntem sıçan beyin dokusu homojenatındaki katekolamin düzeylerinin tayin edilmesi amacıyla uygulanmıştır.