Albümin tabanlı nano taşıyıcılar geliştirilmesi

Abstract

Bu çalışmada; ANADOLUCA (AmiNoAcid Decorated and Light Underpining Conjugation Approach) yöntemi kullanılarak hiyaluronik asit (HA) modifiye albümin nanopartikülleri elde edilmiştir. Bu amaçla, çalışmanın ilk aşamasında, sığır serum albümini (BSA) katyonik hale getirilerek HA modifikasyonu için hazırlanmıştır. Ardından, elde edilen katyonik BSA ile HA etkileştirildikten sonra mikroemülsiyon polimerizasyon tekniğiyle gün ışığında, azot atmosferinde ve oda sıcaklığında nano formatta sentezlenmiştir. Elde edilen nano BSA-HA partiküllerinin dağılımı ve boyut analizi zetametre ile, morfolojik analizi taramalı elektron mikroskobu (SEM) ile, floresans özelliklerindeki değişim floresans spektroskopisi ve yapı analizleri de fourier dönüşümlü infrared spektroskopisi (FTIR), termal gravimetrik analiz (TGA) ve dairesel dikroizm (CD) spektroskopisi ile karakterize edilmiştir. Her bir karakterizasyon işlemi nano BSA partikülleri ile karşılaştırmalı olarak yapılmıştır. Çalışmanın ikinci aşamasında, sentezlenen BSA-HA nanopartiküllerinin pankreas kanseri hücrelerinde in vitro sitotoksisite testleri ve görüntüleme çalışmaları yapılmıştır. Bunun için; PANC-1 ATCC® CRL146 standart hücre hattı kullanılmıştır. Nanopartiküllerin in vitro sitotoksik etkileri 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazolyum bromid (MTT) testi kullanılarak belirlenmiştir. Nanopartiküller toksik olmayan derişimlerde hücre ile etkileştirilerek sentezlenen BSA-HA nanopartiküllerinin floresan özellikleriyle görüntüleme çalışmaları yapılmıştır. Elde edilen verilere göre, BSA-HA nanopartiküllerinin hücre içine girerek, hücrelerin sitoplazmalarında ve membranlarında bulundukları belirlenmiştir.