Production of taxol precursors with yeast cell factories = Oluşturulacak maya hücre fabrikaları ile taksol öncülerının eldesi

Abstract

Taksol Taxus brevifolia tarafından üretilen önemli bir anti-kanser ajandır. Bitkilerde istenilen maddenin üretiminde değişimler görülmesi ve üretimin istikrarsız olmasından dolayı üretim işleminin devamlı ve daha ekonomik olması için, farklı bir kaynağa gereksinim vardır. Bir çok isoprenoid bileşiğin Saccharomyces cerevisiae' da üretimi başarılı bir şekilde gerçekleştirilmiş ve metabolizma mühendisliği çalışmaları kullanılarak, mevalonat yolağında düzenlemeler yapılıp, verimli sonuçlar alınmıştır. Taksolde, yine bu yolla S. cerevisiae' da üretilebilmiştir. Mayada, mevalonat yolağında metabolizma mühendisliği çalışılarak Taksol'ün öncü molekülü olan Taksadien'in üretimini arttırmak için pek çok girişimde bulunulmuştur. Bu çalışmada ise; S.cerevisiae'da taksadien miktarını arttırmak için farnesil difosfat sentaz (ERG20), taksadien sentaz (TS) ve geranyl geranyl diphosphate sentaz (GGPPS) genleri 5 epizomal plazmit ile S. cerevisiae'ya transfer edilmiştir. S.cerevisiae'da taksadien üretimi için GGPPS genleri Taxus canadensis, Sulfolobus acidophilus, Taxus baccata, ve Taxus cuspidata olmak üzere dört farklı suştan elde edilmiş ve taksadien üretimi için en etkili gen belirlenmeye çalışılmıştır. Referans suş ile karşılaştırıldığında Sulfolobus acidophilus'tan alınan GGPPS ile, ERG20, ve TS genleri içeren suşun ile çalkalamalı kültürde taksadien üretiminin kontrol suşa oranla 31 kat arttığı belirlenmişti.