Moleküler baskılanmış polimer tabanlı kriyojel ayırma sistemleri ve biyo-ayırma uygulamaları

Abstract

Bu çalışmada, moleküler baskılanmış polimer (MIP) tabanlı kriyojel ayırma sistemleri hazırlanmış ve bu sistemlerin biyo-ayırma uygulamaları gerçekleştirilmiştir. Bu amaçla; ilk olarak hyaluronik asit (HA) ayırımına yönelik olarak D-glukuronik asit baskılanmış polimerler hazırlanmış ve bu MIP partiküllerinin elementel analiz, Fourier dönüşümlü infrared spektroskopiyle (FTIR) ve şişme testleriyle karakterizasyonu yapılmıştır. Daha sonra, sentezlenmis MIP partikülleri poliakrilamit kriyojeli gözeneklerine tutturulmuştur. MIP içeren kriyojeller, FTIR, şişme testi, taramalı elektron mikroskopi (SEM) ile görüntüleme ve gözenek boyutu analizörü (BET) metoduyla yüzey adsorpsiyon porozimetri yöntemleriyle karakterize edilmiştir. MIP tutturularak hazırlanan kriyojellerin HA adsorpsiyonu spektrofotometrik yöntemle incelenmiştir. Maksimum adsorpsiyon kapasitesi 318 mgg-1, HA nın kriyojel matriksi içindeki glukuronik asit içeren boşluklara bağlanma kapasitesi ise 2x106 M−1 olarak bulunmuştur. Diğer taraftan MIP partikülleri içeren kriyojellerin tekrar kullanılabilirliğine bakılmış ve HA adsorpsiyon kapasitesinde kayda değer bir düşüş olmadığı dolayısıyla hazırlanan polimerlerin tekrar tekrar kullanılabilineceği görülmüştür. Son olarak, HA, balık gözünden izole edilen ve Streptococcus equi RSKK 679 suşu tarafından üretilen HA, hızlı protein sıvı kromatografisi (FPLC) cihazı kullanılarak ayırma-saflastırma işlemi yapılmıştır.